Holotomografia – Mikroskop 3D Cell Explorer

Katalog Nanolive 3D Cell Explorer

Rewolucyjny holograficzny mikroskop tomograficzny (holotomografia) 3D Cell Explorer pozwala na ultraszybkie obrazowanie wnętrza komórki w 3D! Technologia 3D Cell Explorer pozwala na szybkie, nieinwazyjne obrazowanie materiałów biologicznych w wysokiej rozdzielczości. 3D Cell Explorer jest efektem lat ciężkiej pracy i innowacji. Dzięki temu systemowi naukowcy, doktorzy, a nawet studenci mogą bezpośrednio obserwować co się dzieję we wnętrzu komórek i tkanek w czasie rzeczywistym.

3D Cell Explorer to zupełnie nowa technologia na rynku. Dzięki połączeniu holografii laserowiej i rotacyjnego skanowania system pozwala na detekcję zmian propagacji światła przez materiał biologiczny. Efektem jest dystrybucja 3D indeksu załamania światła (RI) w komórce.

Holograficzna mikroskopia tomograficzna (holotomografia) bazuje na obrazowaniu fizycznej wartości – współczynnika załamania światła. Odkrycie to zostało opublikowane w Nature Photonics w styczniu 2013 roku. Pierwszy system bazujący na tej technice powstał w 2015, a jego możliwości zostały docenione wieloma prestiżowymi nagrodami.

Technologia firmy Nanolive pozwala na nieograniczony wgląd w żywe komórki – bez specjalnych modyfikacji lub intensywnego, czasochłonnego przygotowania. Technika nie wymaga żadnej modyfikacji chemicznej lub znaczników. Obserwacja jest całkowicie nieinwazyjna oraz pozwala na rozróżnianie elementów struktury wewnętrznej z rozdzielczością do 200 nm.

Nanolive 3D Cell Explorer to pierwszy na świecie system holotomografii skupiający się na przeżyciowym trójwymiarowym obrazowaniu fizycznej struktury komórek. Dzięki unikalnej konstrukcji system pozwala na akwizycję w pełni trójwymiarowej klatki obrazu co 1,5 sekundy! Ponadto opcja zabudowania inkubatora typu „top-stage” z kontrolą temperatury oraz O2/CO2 pozwana na obrazowanie 4D w praktyce nieograniczone w czasie.

 

 

Więcej informacji na temat zastosowań 3D Cell Explorer znajdą Państwo na stronie Nanolive Aplikacje oraz w Bazie Wiedzy.

 

Konstrukcja 3D Cell Explorer


 

system Próbka umieszczona jest pomiędzy obiektywem powietrznym 60x o wysokiej aperturze numerycznej oraz obrotowym ramieniem iluminacyjnym od góry. Zielone (520 nm) światło z diody laserowej jest dzielone na linię próbki i linię referencyjną. Próbka jest oświetlana przez wiązkę lasera pod kątem 45º, która obraca się w 360º wokół próbki. Seria obrazów holograficznych tworzona jest na przetworniku kamery przez interferencję linii próbki i linii referencyjnej lasera.
Sample-stage Otwarty stolik próbki zapewnia łatwy dostęp i pracę z systemem. Dzięki prześwitowi 60 mm możesz wygodnie wymieniać próbki.
vaporize 3D Cell Explorer to holograficzny system z automatyczną regulacją i kompensacją warunków otoczenia. System sam dostosuje pomiar do próbki i warunków pomiaru.
incubation_system_v3-enger 3D Cell Explorer pozwala na bezproblemową integrację stolika próbki z inkubatorem. Możliwa jest niegraniczona obserwacja żywych komórek w ich naturalnym środowisku (np. 5% CO2,  37°C).
no_phototoxicity Źródło światła (520 nm) jest porównywalnej mocy do naturalnego światła otoczenia. Nie potrzebne jest używanie okularów ochronnych. Dzięki temu nie ma ryzyka fototoksyczności i fotowybielania.

 

Oprogramowanie sterujące STEVE


STEVE jest intuicyjnym, prostym w obsłudze oprogramowaniem, które pozwala na obsługę mikroskopu, opracowanie pomiarów, cyfrowe barwienie oraz analizy ilościowe na przebadanych próbkach.

 

Zastosowania


Interakcje międzykomórkowe


Limfocyty T atakujące komórkę rakową (ID8-ova). Obrazowanie w buforze (PBS + 25mM glukoza + 10mM HEPES) w temperaturze pokojowej, czas obrazowania 41 minut, klatka co 1 sekundę.

Lewy panel – rozkład współczynnika załamania światła w badanym materiale
Prawy panel – rekonstrukcja trójwymiarowa

Obrazowanie wewnątrzkomórkowe


Komórki rakowe skóry myszy (B16,p35) obrazowane w buforze DMEM (Dulbecco’s Modified Eagle Medium) w szalce 35 mm. Obrazowanie w czasie przeprowadzone przy użyciu zintegrowanego inkubatora „top stage” w temperaturze 37°C i stężeniu 5% CO2 przez 8 godzin, klatka pobierana co minutę.

Lewy panel – rozkład współczynnika załamania światła w badanym materiale
Prawy panel – rekonstrukcja trójwymiarowa

Histologia


Skrawek mięśnia sercowego myszy o grubości 8 um w parafinie.

Lewy panel – rozkład współczynnika załamania światła w badanym materiale
Prawy panel – rekonstrukcja trójwymiarowa

Internalizacja nanocząstek


Komórki HUVEC (Human Umbilical Vein Endothelial Cell) obrazowane w szalce 35mm utrwalone 1%PFA przez 15 minut i płukane buforem PBS. Komórki zostały wystawione na działanie nanocząstek złota o średnicy 40nm.

Lewy panel – rozkład współczynnika załamania światła w badanym materiale
Prawy panel – rekonstrukcja trójwymiarowa

Śmierć komórek


Obrazowanie przebiegu apoptozy ludzkiej komórki rakowej T685.

Lewy panel – rozkład współczynnika załamania światła w badanym materiale
Prawy panel – rekonstrukcja trójwymiarowa

Podziały komórkowe


Mitoza mysich komórek macierzystych (mESC) obrazowana w medium DMEM (Dulbecco’s Modified Eagle Medium) w szalce 35 mm. Obrazowanie wykonane w zintegrowanym inkubatorze „top-stage” w temperaturze 37°C i stężeniu 5% CO2, przez 5,5 godziny, klatka co 30s.

Lewy panel – rozkład współczynnika załamania światła w badanym materiale
Prawy panel – rekonstrukcja trójwymiarowa

Popularyzacja nauki


Przykład zastosowania obrazowania dla popularyzacji nauki. Obrazowanie w 3D komórek pobranych wacikiem z wnętrza policzka.

Lewy panel – rozkład współczynnika załamania światła w badanym materiale
Prawy panel – rekonstrukcja trójwymiarowa

Specyfikacja techniczna 3D Cell Explorer


 

 holotomografia 3D CX

Obiektyw: 60x Nikon

Laser: 520 nm, energia na próbce 0,2 mW/mm2

Rozdzielczość: XY 200 nm, Z 500 nm

Pole obrazowania:  ~80 um

Głębia ostrości: ~30 um

Szybkość obrazowania: 0,6 fps (3D)

Kalibracja: W pełni automatyczna kalibracja

Wymiary: 38 x 45 x 17 cm

Waga: 8kg

 

Inkubator ibidi do 3D Cell Explorer


System 3D Cell Explorer może zostać wyposażony w zintegrowany inkubator firmy ibidi. Dzięki temu unikalnemu połączeniu możliwe jest wykonywanie pomiarów 4D trwających nawet kilka dni. Temperatura, wilgotność, pH mogą być kontrolowane na bieżąco podczas pomiarów.

03

Nanolive-ibidi2

Portal jest własnością firmy IGHT s.c.
Copyright © 2013 www.labnatek.pl.